COLTURA IN VITRO. Qual'è la composizione esatta in peso degli elementi da sciogliere nell'agar?
Voglio realizzare una coltura in vitro partendo da cellule di meristemi apicali di varie piante.
Potete segnalarmi dei link?
Ho già una certa esperienza di colture in vitro, batteriche tuttavia!!
2 risposte
- 1 decennio faRisposta preferita
Ti do il terreno di coltura più utilizzato (Murashige e Skoog) più o meno rivisitato:
MACROELEMENTI (mg/l)
NH4NO3 1,650
KNO3 1,900
KH2PO4 170
CaCl2 * 2h2O 440
MgSO4 * 7H2O 370
MICROLELEMENTI (mg/l)
H3BO3 6,20
KI 0,83
MnSO4 * 4H2O 22,3
ZnSO4 * 7H2O 8,6
Na2MoO4 * 2H2O 0,25
CuSo4 * 5H2O 0,025
CoCl2 * 6H2O 0,025
FERRO (mg/I)
FeSo4 * 7H2O 7,8
oppure
FeNa2 EDTA 40
VITAMINE (mg/l)
glicina 2
Ac. nicotinico 0,5
tiamina HCl 0,1
Piridossina HCl 0,5
ALTRI COMPONENTI
Myo-inosotolo 100 (0,1 g/l)
saccarosio 30 (g/l)
Agar 6/8 (g/l)
Il pH deve essere 5,7-5,8 e l'agar devi metterlo dopo aver aggiustato il pH. Se i meristemi vuoi metterli nelle petri ti conviene preparare il tutto in una beuta e mettere il terreno di coltura nelle petri dopo averlo sterilizzato in autoclave, anche le petri devono essere sterili; se invece vuoi mettere i meristemi in vasi, ti conviene prima mettere l'agar nei vasi, es 10 vasi più o meno 0,7g di agar per vaso e 100ml di mezzo per vaso, poi chiudi bene i vasi e sterilizzi tutto in autoclave.
Spero di esserti stata utile.
In bocca al lupo per le tue piantine
Fonte/i: Esperienza personale - simone gLv 61 decennio fa
Cerca tra questi risultati, i dati che ti servono dovrebbero essere sotto la voce "Methods" negli articoli scientifici: